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SOB培养基的试验方法与现象
发表时间:2025-01-13一、试验用途:
用于基因工程大肠杆菌的培养。
二、试验原理:
胰蛋白胨和酵母浸粉提供基本营养,氯化钾、氯化钠和氯化镁可维持渗透压并提供细菌生长所需的基本元素,促进有关酶的合成。
三、培养基配方(g/L)
胰蛋白胨 |
20.0 |
酵母浸粉 |
5.0 |
氯化钾 |
0.186 |
氯化钠 |
0.5 |
氯化镁 |
0.95 |
pH值7.0±0.2 |
25℃ |
四、试验方法:
1、称取本品26.6g,加热溶解于1000ml纯化水中,分装于试管中,每管9ml, 121℃高压灭菌15min,备用。
2、将标准储备菌株接种到非选择性肉汤培养过夜或采用其他制备方法,制备成含菌量10-100CFU/mL的菌悬液。
3、在装有待测培养基的试管中接种1 mL目标菌,同时接种两个平行管,置于36±1℃培养18-24h。
五、 试验结果:
接种以下质控菌株,36±1℃培养18-24h
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
试验结果 |
大肠埃希氏菌 |
ATCC25922 |
10-100 |
浑浊 |
大肠埃希氏菌 |
DH5α |
10-100 |
浑浊 |
大肠埃希氏菌 |
DH101 |
10-100 |
浑浊 |
六、SOB培养基微生物实验结果:
a:大肠埃希氏菌ATCC25922;b:大肠埃希氏菌DH5α;c:大肠埃希氏菌DH101;d:空白
注意:
本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。
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