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SOB培养基的试验方法与现象

发表时间:2025-01-13

一、试验用途:

用于基因工程大肠杆菌的培养。

二、试验原理:

胰蛋白胨和酵母浸粉提供基本营养,氯化钾、氯化钠和氯化镁可维持渗透压并提供细菌生长所需的基本元素,促进有关酶的合成。

三、培养基配方(g/L)

胰蛋白胨
20.0
酵母浸粉
5.0
氯化钾
0.186
氯化钠
0.5
氯化镁
0.95
pH值7.0±0.2
25℃

四、试验方法:

1、称取本品26.6g,加热溶解于1000ml纯化水中,分装于试管中,每管9ml, 121℃高压灭菌15min,备用。 

2、将标准储备菌株接种到非选择性肉汤培养过夜或采用其他制备方法,制备成含菌量10-100CFU/mL的菌悬液。 

3、在装有待测培养基的试管中接种1 mL目标菌,同时接种两个平行管,置于36±1℃培养18-24h。 

五、 试验结果:

接种以下质控菌株,36±1℃培养18-24h

质控菌株
菌株编号
接种量(CFU)
试验结果
大肠埃希氏菌
ATCC25922
10-100
浑浊
大肠埃希氏菌
DH5α
10-100
浑浊
大肠埃希氏菌
DH101
10-100
浑浊

六、SOB培养基微生物实验结果:

a:大肠埃希氏菌ATCC25922b:大肠埃希氏菌DH5α;c:大肠埃希氏菌DH101d:空白

注意:

本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。

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