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乳酸杆菌选择性培养基原理及实验现象
发表时间：2024-12-02
一、用途：用于乳酸菌的分离培养。
二、实验原理：
胰酪蛋白胨、牛酵母浸粉提供氮源、维生素、生长因子；葡萄糖提供碳源；磷酸氢二钾为缓冲剂；枸橼酸三铵、硫酸镁、硫酸锰、硫酸亚铁、吐温-80和乙酸钠为培养各种乳酸菌提供生长因子，吐温80为乳酸杆菌提供所需的代谢脂肪酸；柠檬酸铵和乙酸钠能够抑制一些杂菌的生长，包括链球菌、霉菌和除乳酸杆菌外的大多数口腔微生物菌群；加入乙酸，使pH值降低，抑制了其它细菌的生长，有利于乳酸杆菌的分离；加入碳酸钙是由于乳酸菌在培养基中产酸可以形成溶钙环，便于区分；琼脂是培养基的凝固剂。
三、培养基配方（g/L）
二、实验原理：
胰酪蛋白胨、牛酵母浸粉提供氮源、维生素、生长因子；葡萄糖提供碳源；磷酸氢二钾为缓冲剂；枸橼酸三铵、硫酸镁、硫酸锰、硫酸亚铁、吐温-80和乙酸钠为培养各种乳酸菌提供生长因子，吐温80为乳酸杆菌提供所需的代谢脂肪酸；柠檬酸铵和乙酸钠能够抑制一些杂菌的生长，包括链球菌、霉菌和除乳酸杆菌外的大多数口腔微生物菌群；加入乙酸，使pH值降低，抑制了其它细菌的生长，有利于乳酸杆菌的分离；加入碳酸钙是由于乳酸菌在培养基中产酸可以形成溶钙环，便于区分；琼脂是培养基的凝固剂。
三、培养基配方（g/L）
|
酵母浸粉 |
2.0 |
|
胰酪蛋白胨 |
10.0 |
|
磷酸二氢钾 |
2.0 |
|
牛肉浸粉 |
10.0 |
|
硫酸镁 |
0.2 |
|
葡萄糖 |
20.0 |
|
乙酸钠 |
5.0 |
|
枸橼酸三铵 |
2.0 |
|
硫酸锰 |
0.05 |
|
碳酸钙 |
5.0 |
|
吐温80 |
1.0 |
|
琼脂 |
25.0 |
|
pH 6.0-6.5 |
25℃ |
此配方可以进行改良或增加营养成分以获得最佳的结果
四、试验方法：
1、称取本品82.25g，加热溶解于1000ml蒸馏水中，分装三角瓶,每瓶 200ml，115℃高压灭菌15-20min，冷至50℃左右时，倾入无菌平皿，备用。
2、制备质控菌液。
3、用1μL接种环取非目标菌质控菌液1环，将接种环接触容器边缘3次去除多余液体，在平板表面划三区，同时接种两个平板。
4、36±1℃下培养24-48小时，记录实验结果。
五、结果观察与解释：
接种以下质控菌株，在36±1℃下培养24-48小时：
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质控菌株 |
菌株编号 |
接种量(CFU) |
方法 |
质控评定标准 |
其他特征 |
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嗜酸乳杆菌 |
CICC6005 |
/ | 定性 | +++ |
白色突起菌落，有溶钙环 |
|
植物乳杆菌 |
ATCC8014 |
/ | 定性 | +++ |
白色突起菌落，有溶钙环 |
植物乳杆菌微生物质控结果
六、注意事项
本培养基仅为细菌鉴定的一部分，需做其他补充试验。
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