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V-J琼脂培养基的原理和使用方法
一、试验原理：
本培养基用于金黄色葡萄球菌的选择性分离培养。
明胶蛋白胨、酵母浸粉为微生物的生长提供氮源、碳源及维生素；甘露醇为可发酵糖类；酚红为酸碱指示剂；磷酸氢二钾为pH缓冲剂；甘氨酸和氯化锂对金黄色葡萄球菌以外的其它菌株有抑制作用；较高浓度的亚碲酸钾可抑制多数杂菌的生长，金黄色葡萄球菌可还原亚碲酸钾，使菌落显黑色，同时可分解培养基中的甘露醇产酸，使培养基变黄；琼脂是培养基的凝固剂。
二、培养基配方（g/L）：
三、试验方法：
1、称取本品61.0g，加热搅拌溶解于1000 mL蒸馏水中，煮沸1分钟，121℃高压灭菌15min，冷至45-50℃左右时，加入20 mL过滤除菌的1%亚碲酸钾溶液，混匀，倾入无菌平皿。
2、制备质控菌液，接种到培养基上。
3、放置于30-35℃恒温培养箱中需氧培养24-48小时。
四、结果观察与解释
接种以下质控菌株，放置于30-35℃恒温培养箱中需氧培养24-48小时。
|
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量 |
回收率 |
生长情况 |
其它特征 |
|
金黄色葡萄球菌 |
ATCC 25923 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
黑色菌落， 菌落周围黄色 |
|
金黄色葡萄球菌 |
ATCC 6538 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
黑色菌落， 菌落周围黄色 |
|
表皮葡萄球菌 |
CMCC（B）26069 |
10-100 |
≥70% |
+++ |
黑色菌落， 菌落周围不变色 |
|
大肠埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
100-1000 |
/ |
﹣ |
抑制 |
图1 V-J琼脂培养基微生物质控结果
a：金黄色葡萄球菌ATCC 25923；b：金黄色葡萄球菌ATCC 6538；
c：表皮葡萄球菌CMCC（B）26069；d：大肠埃希氏菌ATCC 25922
